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酶解法分離與同源血清培養(yǎng)SD大鼠胃Cajal間質(zhì)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究

作者:寧海恩 凌江紅 張智 王煜姣 上官鑫超 廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 廣西南寧530021

摘要:[目的]探討體外酶解法分離、同源血清培養(yǎng)SD大鼠胃Cajal間質(zhì)細(xì)胞(ICC)的實(shí)驗(yàn)方法。[方法]無菌條件下分離大鼠胃竇組織,酶解法分離制備ICC細(xì)胞懸液,接種于M199完全培養(yǎng)基(含10%大鼠同源血清,不含胎牛血清及重組鼠類干細(xì)胞因子)進(jìn)行培養(yǎng),倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化,適時(shí)換液,MTT法測(cè)定ICC對(duì)數(shù)生長(zhǎng)曲線,C-kit特異性抗體免疫熒光染色法鑒定ICC,并取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)。[結(jié)果]同源血清培養(yǎng)ICC成活并體現(xiàn)其特有的生長(zhǎng)曲線及形態(tài)學(xué)特征,C-kit特異性抗體免疫熒光染色證實(shí)細(xì)胞為ICC,且細(xì)胞傳代培養(yǎng)成功。[結(jié)論]酶解法可以對(duì)SD大鼠胃竇ICC進(jìn)行分離,在不使用胎牛血清(FBS)及重組鼠類干細(xì)胞因子(SCF)培養(yǎng)的條件下,含大鼠同源血清的M199完全培養(yǎng)基可以完成ICC原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)。該項(xiàng)培養(yǎng)方法可行,為研究ICC生物學(xué)特性及其與胃腸病學(xué)的臨床和基礎(chǔ)關(guān)系奠定基礎(chǔ)。

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