酶解法分離與同源血清培養(yǎng)SD大鼠胃Cajal間質(zhì)細胞的實驗研究
摘要：[目的]探討體外酶解法分離、同源血清培養(yǎng)SD大鼠胃Cajal間質(zhì)細胞（ICC）的實驗方法。[方法]無菌條件下分離大鼠胃竇組織,酶解法分離制備ICC細胞懸液,接種于M199完全培養(yǎng)基（含10%大鼠同源血清,不含胎牛血清及重組鼠類干細胞因子）進行培養(yǎng),倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)變化,適時換液,MTT法測定ICC對數(shù)生長曲線,C-kit特異性抗體免疫熒光染色法鑒定ICC,并取對數(shù)生長期細胞進行傳代培養(yǎng)。[結(jié)果]同源血清培養(yǎng)ICC成活并體現(xiàn)其特有的生長曲線及形態(tài)學(xué)特征,C-kit特異性抗體免疫熒光染色證實細胞為ICC,且細胞傳代培養(yǎng)成功。[結(jié)論]酶解法可以對SD大鼠胃竇ICC進行分離,在不使用胎牛血清（FBS）及重組鼠類干細胞因子（SCF）培養(yǎng)的條件下,含大鼠同源血清的M199完全培養(yǎng)基可以完成ICC原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)。該項培養(yǎng)方法可行,為研究ICC生物學(xué)特性及其與胃腸病學(xué)的臨床和基礎(chǔ)關(guān)系奠定基礎(chǔ)。
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廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報雜志
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