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重組酪氨酸酚裂解酶發(fā)酵工藝的研究

作者:湯曉玲; 楊健; 王志超; 索慧; 鄭仁朝 浙江工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院; 浙江杭州310014

摘要:左旋多巴是治療帕金森氏病的首選藥物,生物酶法合成左旋多巴具有工藝簡(jiǎn)單、條件溫和、立體選擇性高和環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)。本論文以實(shí)驗(yàn)室前期構(gòu)建的表達(dá)具核梭桿菌(Fusobacterium nucleatum)TPL(Fn-TPL)的重組大腸桿菌為基礎(chǔ),采用單因素實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)5L發(fā)酵罐發(fā)酵工藝優(yōu)化以及補(bǔ)料策略的研究,確定了分批發(fā)酵的工藝參數(shù):pH6.5,誘導(dǎo)溫度30℃,誘導(dǎo)劑乳糖20g/L。在5L發(fā)酵罐中,進(jìn)一步研究了10mL/h、20mL/h、30mL/h三個(gè)速率的恒速流加對(duì)菌體生物量和TPL酶活的影響。結(jié)果表明,補(bǔ)料速率為20mL/h時(shí),生物量最高為30.43gdcw/L,體積酶活最高為9420U/L,較搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)活力提高了3.3倍。

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