摘要：目的通過腺病毒法建立穩(wěn)定表達(dá)外源性人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)基因的牙周膜細(xì)胞系,以構(gòu)建腺病毒介導(dǎo)的高效、穩(wěn)定的hTERT牙周膜細(xì)胞系。方法聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)法擴(kuò)增hTERT基因編碼序列,構(gòu)建同源重組腺病毒質(zhì)粒pAd-pshuttle-cmv-hTERT,收集腺病毒顆粒后感染人牙周膜細(xì)胞,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測hTERT及成骨相關(guān)基因堿性磷酸酶、核心結(jié)合因子2、骨涎蛋白、骨鈣素、骨橋素、Ⅰ型膠原蛋白mRNA的表達(dá)水平,茜素紅染色觀察成骨分化能力,CCK-8檢測細(xì)胞增殖能力。結(jié)果成功構(gòu)建了含hTERT基因的腺病毒顆粒并感染牙周膜細(xì)胞,感染細(xì)胞與正常牙周膜細(xì)胞形態(tài)相似;實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示hTERT及成骨相關(guān)基因在感染細(xì)胞中高表達(dá);茜素紅染色顯示牙周膜細(xì)胞系成骨能力強(qiáng);CCK-8結(jié)果示牙周膜細(xì)胞系增殖能力強(qiáng)。結(jié)論通過腺病毒法成功建立了過表達(dá)hTERT的人牙周膜細(xì)胞系,其具有較強(qiáng)的成骨分化能力,這為研究牙周膜再生機(jī)制提供了一個(gè)理想的細(xì)胞系。