摘要：惡性瘧原蟲PfMAg-1蛋白為裂殖子表面相關(guān)蛋白,為了探究PfMAg-1的功能,本研究采用規(guī)律成簇間隔短回文重復(fù)及相關(guān)失活蛋白（Clustered regulatory interspaced short palindromic repeats/dead CRISPR-associated protein 9,CRISPR/dCas9）技術(shù),構(gòu)建惡性瘧原蟲PfMAg-1低表達(dá)質(zhì)粒,電穿孔方法轉(zhuǎn)染后通過抗稻瘟菌素（Blasticidin S Deaminase,BSD）篩選出惡性瘧原蟲MAg1KD（Knock Down,KD）蟲株.通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction,PCR）、 實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（quantitative Real Time Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR）檢測PfMAg-1表達(dá)水平.在體外培養(yǎng)條件下觀察MAg1KD蟲株生長趨勢及裂殖子入侵效率來評價PfMAg-1的表達(dá)對惡性瘧原蟲紅內(nèi)期增殖的影響.結(jié)果表明,惡性瘧原蟲MAg1 KD蟲株較對照蟲株的體外生長率顯著降低,進一步實驗提示影響瘧原蟲增殖速度的原因是MAg1 KD蟲株裂殖子入侵效率下降.本研究證實PfMAg-1在惡性瘧原蟲裂殖子入侵紅細(xì)胞時發(fā)揮重要作用,為進一步評價PfMAg-1蛋白作為瘧疾疫苗候選抗原的前景提供了實驗依據(jù).