摘要：糖苷水解酶第一家族（GH1）β-葡萄糖苷酶（BGL1）有葡萄糖耐受性,進(jìn)口端位點(diǎn)對(duì)酶活性及葡萄糖耐受性有很大影響,但具體作用機(jī)制尚不清楚。對(duì)嗜熱革節(jié)孢GH1 BGL1進(jìn)口端的W168、L173、F348、W349、C169、F180、D237、Y179、A260、H307、N335和E437這12個(gè)氨基酸殘基進(jìn)行定點(diǎn)突變,將突變酶與野生酶（WT）在畢赤酵母中表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物純化后進(jìn)行酶活性和葡萄糖耐受性測(cè)定。與WT相比,所有突變酶活性均有所降低,其中W168H、N335F和W349G幾乎喪失活性。突變F180H、D237S、A260N和H307Y的Km低于WT,所有突變的kcat都降低。除L173Q外,其余突變都保持葡萄糖耐受性,在高濃度（400 mmol/L）葡萄糖時(shí),Y179F和D237S酶活受到顯著抑制。本研究表明,進(jìn)口端位點(diǎn)對(duì)酶活性及葡萄糖耐受性均具有一定影響,催化活性通道的結(jié)構(gòu)特異性可能是葡萄糖耐受機(jī)制。