摘要:目的: 研究分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)對脂肪干細(xì)胞(ADSC)成骨分化的影響。 方法: 利用重組慢病毒載體的SFRP2 shRNA基因敲除ADSC中SFRP2進(jìn)行喪失性功能研究;利用HA-SFRP2逆轉(zhuǎn)錄病毒載體過表達(dá)SFRP2進(jìn)行獲得性功能研究;定量RT-PCR和Western Blot檢測基因表達(dá);堿性磷酸酶活性(ALP)測定、茜素紅染色、鈣離子定量以及定量RT-PCR檢測脂肪干細(xì)胞的體外成骨分化能力。 結(jié)果: 定量RT-PCR和Western Blot顯示SFRP2sh可以在ADSC中有效的抑制SFRP2的表達(dá);ALP、茜素紅和鈣離子定量結(jié)果顯示敲除SFRP2能明顯抑制ADSC體外成骨分化能力;定量RT-PCR結(jié)果顯示敲除SFRP2抑制骨涎蛋白(BSP)、Osterix(Osx)和Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)的表達(dá);定量RT-PCR和Western Blot顯示HA-SFRP2可以在ADSC中有效的過表達(dá);ALP、茜素紅和鈣離子定量結(jié)果顯示過表達(dá)SFRP2能明顯促進(jìn)ADSC體外成骨分化能力;定量RT-PCR顯示過表達(dá)SFRP2明顯促進(jìn)BSP的表達(dá)。 結(jié)論: SFRP2促進(jìn)脂肪干細(xì)胞的體外成骨分化功能。
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