摘要:目的:探索體外培養(yǎng)的體細(xì)胞經(jīng)過低pH處理后的特性和分化特征,為感音神經(jīng)性聾提供新的治療策略。方法:選取人成熟體細(xì)胞作為目標(biāo)細(xì)胞,選擇幾種pH值不同溶液分別處理細(xì)胞,對細(xì)胞的形態(tài)進(jìn)行觀察,從堿性磷酸酶(AKP)活性、免疫組織化學(xué)染色、分子生物學(xué)等方面對細(xì)胞的特性進(jìn)行鑒定,選出最適應(yīng)pH值。對誘導(dǎo)后細(xì)胞體外進(jìn)行神經(jīng)干定向誘導(dǎo),再將基膜以膽紅素處理,建立感音神經(jīng)性聾體外模型,驗證誘導(dǎo)后細(xì)胞的體外分化能力以及治療功能;驗證方法為形態(tài)學(xué)、AKP活性、免疫組織化學(xué)、分子生物學(xué)等手段。結(jié)果:實驗組細(xì)胞生長明顯優(yōu)于對照組;實驗組AKP活性高于對照組;Nanog和Oct4的表達(dá)在2組均為陽性;將處理后的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)液中,Nestin表達(dá)陽性。結(jié)論:低pH處理后的人體細(xì)胞顯示出與誘導(dǎo)多能干細(xì)胞相似的特性,但其功能和治療效果有待進(jìn)一步研究。
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