結(jié)直腸腺瘤中DNMT3B表達(dá)及RASSF1A甲基化分析
摘要：目的探討DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的表達(dá)及抑癌基因RASSF1A的甲基化及兩者表達(dá)與較大結(jié)直腸腺瘤(colorectal adenoma,CA)的關(guān)系。方法選取20對直徑≥10 mm的CA患者組織及對應(yīng)瘤旁組織作為對照,分別使用Real-time PCR和Western blot技術(shù)檢測DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA和蛋白表達(dá)變化,應(yīng)用亞硫酸氫鹽限制性酶切分析(COBRA)技術(shù)分析重復(fù)序列LINE-1甲基化水平,應(yīng)用甲基化特異性PCR(MS-PCR)技術(shù)分析抑癌基因RASSF1A的甲基化水平。結(jié)果與對照組相比,CA中DNMT3B的mRNA和蛋白水平升高,DNMT3B的活性顯著升高。CA組織中LINE-1甲基化水平降低,腫瘤抑制基因RASSF1A的啟動子甲基化水平升高,且表達(dá)降低。結(jié)論 DNMT3B過表達(dá)可能在CA的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用,具體機制可能與降低整體甲基化水平和升高抑癌基因RASSF1A甲基化水平有關(guān)。
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