摘要:微生物細(xì)胞木糖代謝對(duì)生物質(zhì)水解液全利用和促進(jìn)特定重要化學(xué)品的合成具有重要意義.谷氨酸棒桿菌為重要的氨基酸工業(yè)生產(chǎn)菌株,由于缺乏木糖異構(gòu)酶編碼基因而不能代謝木糖.本研究通過(guò)質(zhì)粒過(guò)表達(dá)不同來(lái)源的木糖異構(gòu)酶基因xylA,實(shí)現(xiàn)了菌株對(duì)木糖的利用,其中大腸桿菌木糖異構(gòu)酶效果最好.由于木糖異構(gòu)酶的活性是制約菌株代謝木糖的瓶頸因素,因此對(duì)啟動(dòng)子的SD序列進(jìn)行了替換以促進(jìn)翻譯效率,使菌株在木糖培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的A600值達(dá)到出發(fā)菌的2.7倍.通過(guò)基因組整合3個(gè)拷貝的優(yōu)化后xylA表達(dá)模塊,實(shí)現(xiàn)了無(wú)質(zhì)粒的木糖代謝工程菌株的構(gòu)建,為后續(xù)谷氨酸棒桿菌利用木糖生產(chǎn)高附加值化學(xué)品的代謝工程研究奠定基礎(chǔ).
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