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連接蛋白43在遠端缺血預處理防治兔脊髓缺血再灌注損傷中對血脊髓屏障的作用及機制

作者:張燕; 張雙霜; 胡霽; 袁芬; 劉嬌; 戴軍 華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬梨園醫(yī)院; 武漢480077

摘要:目的:探討連接蛋白43(Cx43)在遠端缺血預處理(RIPC)防治兔脊髓缺血再灌注損傷(SCIRI)中對血-脊髓屏障(BSCB)的作用及機制。方法:36只健康日本大耳白兔,按照完全隨機數(shù)字法分為3組(每組12只):假手術(shù)組(Sham組)、缺血再灌注損傷組(I/R組)、遠端缺血預處理組(I/R+R組)。分別于恢復灌注后48h行后肢神經(jīng)運動功能評分,HE染色觀察脊髓組織病理變化及正常運動神經(jīng)元數(shù)量,TUNEL凋亡染色觀察脊髓組織神經(jīng)細胞凋亡情況,伊文思藍(EB)檢測血脊髓屏障的通透性,熒光定量PCR(RT-PCR)檢測脊髓組織Cx43mRNA水平,Western blot檢測脊髓組織Cx43、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-1β(IL-1β)及基質(zhì)金屬蛋白酶-2/9(MMP-2/9)蛋白表達變化。結(jié)果:與Sham組比較,I/R組后肢神經(jīng)運動功能評分顯著降低(P〈0.05),脊髓結(jié)構(gòu)損傷嚴重,凋亡神經(jīng)細胞數(shù)明顯增加(P〈0.01),血脊髓屏障滲透性明顯增加,Cx43 mRNA及Cx43、TNF-α、IL-1β和MMP-2/9蛋白表達均顯著增加(P〈0.05);與I/R組比較,I/R+R組后肢神經(jīng)運動功能評分增高(P〈0.05),脊髓損傷較輕,正常運動神經(jīng)元數(shù)量增加(P〈0.05),凋亡神經(jīng)性細胞數(shù)明顯減少(P〈0.05),血脊髓屏障滲透性明顯降低,Cx43mRNA及Cx43、TNF-α、IL-1β和MMP-2/9蛋白表達均顯著減少(P〈0.05)。結(jié)論:RIPC可以保護SCIRI時BSCB的完整性,減輕脊髓損傷,改善后肢神經(jīng)運動功能,其保護機制可能與RIPC抑制Cx43的表達,從而下調(diào)TNF-α、IL-1β及MMP-2/9蛋白表達水平有關(guān)。

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微循環(huán)學

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