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DEAE-Sepharose FF 純化脊髓灰質炎病毒Sabin株Ⅰ型穩(wěn)定性研究

作者:高承剛; 李衛(wèi)東; 楊曉蕾 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院醫(yī)學生物學研究所; 云南昆明650018

摘要:目的觀察離子交換純化脊髓灰質炎病毒Ⅰ型Sabin株穩(wěn)定性,以研究病毒純化的回收率和質量控制。方法使用微載體培養(yǎng)Vero細胞和脊灰病毒Ⅰ型Sabin株,經(jīng)過逐級過濾澄清和100K超濾膜濃縮,再經(jīng)凝膠介質初步純化后的病毒液,然后觀察經(jīng)過離子介質DEAE Sepharose FF層析純化5批次的純化效果。對每次純化獲得的病毒液測定D抗原、蛋白質含量、牛血清白蛋白含量、DNA殘留量以評價其質量。結果凝膠純化后的病毒液,經(jīng)離子介質DEAE Sepharose FF純化,其D抗原、蛋白質含量、牛血清白蛋白含量、DNA殘留量和比活性的批間差異不顯著(P>0.05)。結論離子介質DEAE Sepharose FF在一定批次內(nèi)純化脊灰病毒工藝穩(wěn)定。

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