摘要:目的 探究miR-197-3p/前列腺六次跨膜蛋白(Six transmembrane protein of prostate,STAMP)2對氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導的人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)凋亡和炎癥應答。方法 用ox-LDL處理HUVEC復制內皮細胞損傷模型;RT-PCR檢測miR-197-3p和STAMP2表達;ELISA檢測細胞凋亡;Western blot用于檢測STAMP2,Bax和Bcl-2的蛋白水平;ELISA檢測HUVECs中細胞間黏附分子(ICAM)-1,血管內皮細胞黏附分子(VCAM)-1和E選擇素(E-selectin)的表達水平;生物信息學預測miR-197-3p的靶基因;并采用雙螢光素酶報告系統(tǒng)、qRT-PCR及Western blot驗證miR-197-3p與STAMP2的靶向調控關系。結果 ox-LDL能明顯上調miR-197-3p的表達(P〈0.05),同時降低STAMP2的表達(P〈0.05),且呈時間依賴性;下調miR-197-3p能夠顯著抑制ox-LDL誘導的細胞凋亡(P〈0.05),同時降低促凋亡蛋白Bax并增加抑凋亡蛋白Bcl-2(P〈0.05);抑制miR-197-3p明顯降低ox-LDL誘導的炎癥因子的表達(P〈0.05);此外,生物信息學預測提示STAMP2是miR-197-3p的靶基因,而且qRT-PCR及Western blot結果顯示抑制miR-197-3p明顯上調STAMP2 mRNA和蛋白水平(P〈0.05),從而證實miR-197-3p能夠靶向調控STAMP2。結論 MiR-197-3p可以通過靶向調控STAMP2從而調節(jié)ox-LDL誘導的HUVECs凋亡及炎癥應答,為動脈粥樣硬化的靶向治療提供理論基礎。
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