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摘要：目的探究mieroRNA-195-5p (miR-195-5p)對宮頸癌HeLa細胞侵襲和遷移能力及宮頸癌腫瘤移植模型小鼠存活的影響。方法RT-PCR檢測宮頸癌患者癌組織及癌旁組織、正常宮頸上皮細胞NC104和宮頸癌細胞株HeLa、CaSki、C33A和SiHa中miR-195-5p和血管內(nèi)皮生長因子A (vascular endothelialgrowth factor A, VEGFA)的 niRNA 水平。miR-195 mimic 轉(zhuǎn)染細胞,RT-PCR 檢測 miR-19-5p 和 VEGFA 的表達。熒光素酶報告實驗驗證miR-195-5p和VEGFA靶向關系。miR-195 mimic和pcDNA VEGFA ( pc-VEGFA)分別或同時轉(zhuǎn)染細胞.免疫印跡檢測VEGFA表達,MTT檢測細胞增殖,流式檢測細胞凋亡,Transwell和劃痕實驗分別檢測細胞侵襲和遷移能力,免疫印跡檢測Ki67、Bel-2 , Bax、VEGF受體1 (VEGF receptor1, VEGFR1),基質(zhì)金屬蛋白酶-2 (metalloproteinase-2, MMP-2)和MMP-9的表達。建立宮頸癌移植瘤裸鼠模型,記錄小鼠存活情況及腫瘤體積,Tunnel檢測腫瘤組織細胞凋亡情況,免疫組化檢測Ki67表達,免疫印跡檢測VEGFR1、MMP-2和MMP-9的表達。結果與癌旁組織比較,癌組織miR-195-5p表達水平明顯降低,VEGFA表達水平明顯升高;與NC104細胞比較,miR-195-5p在多類宮頸癌細胞中表達顯著升高,VEGF RNA水平明顯降低。miR-195 mimic能顯著上調(diào)miR-195-5p表達水平,抑制VEGFA RNA表達,并且能降低VEGFA野生質(zhì)粒(wild type, wt)熒光素酶活性。pc-VEGFA能顯著促進VEGFA表達,miR-195 mimic能顯著降低HeLa細胞生長速度和Ki67、Bcl-2表達水平,上調(diào)細胞凋亡率及Bax表達水平;pc-VEGFA 能顯著減弱miR-195 mimic對細胞增殖、Ki67和Bcl-2表達的抑制作用和對細胞凋亡及Bax表達的誘導作用。同時,miR-195 mimic能減少HeLa細胞侵襲數(shù)并降低細胞遷移率,抑制VEGFR1、MMP-2和MMP-9表達,pc-VEGFA能顯著減弱miR-195 mimic對細胞侵襲和遷移的抑制作用;此外,與Control組比較,miR-195 mimic組模型小鼠存活率明顯升高,腫瘤生長明顯被抑制,腫瘤組織細胞細胞凋亡率明顯升高,VEGF