摘要：本研究參考GenBank中藍(lán)舌病毒16型(Bluetongue virus serotype16,BTV-16)標(biāo)準(zhǔn)株RSAvvvv的序列,人工合成編碼BTV-16NS2蛋白的S8基因,將其亞克隆至原核表達(dá)載體pPRoEx-HTb中,構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pPro-NS2,并轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21進(jìn)行IPTG誘導(dǎo)表達(dá),并進(jìn)行可溶性分析。SDS-PAGE結(jié)果顯示,表達(dá)的rNS2蛋白主要以包涵體的形式存在于菌體中。利用組氨酸標(biāo)簽純化樹(shù)脂獲得了高純度的NS2蛋白,免疫新西蘭白兔制備抗NS2蛋白的多克隆抗體。Westernblot結(jié)果顯示,制備的抗NS2蛋白多克隆抗體不僅可與重組表達(dá)的rNS2蛋白反應(yīng),而且可與BTV感染細(xì)胞后的天然NS2蛋白反應(yīng)。間接免疫熒光結(jié)果顯示,該抗體也可與BTV感染C6/36細(xì)胞中的天然NS2蛋白反應(yīng),且發(fā)現(xiàn)NS2大量分布于C6/36細(xì)胞的胞質(zhì)中。本研究所制備的NS2蛋白的多克隆抗體具有很好的反應(yīng)性和特異性,為進(jìn)一步研究NS2蛋白的功能奠定了基礎(chǔ)。