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水稻矮縮病毒Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生質(zhì)體后的表達(dá)

作者:張潔; 宛柏杰; 尚鵬祥; 丁新倫; 杜振國(guó); 吳祖建 福建農(nóng)林大學(xué)植物病毒研究所/福建省植物病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/閩臺(tái)作物有害生物生態(tài)防控國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 福州350002; 江蘇沿海地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所; 江蘇鹽城224000

摘要:【目的】為明確水稻矮縮病毒(Ricedwarfvirus,RDV)Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生質(zhì)體后的表達(dá)動(dòng)態(tài),【方法】利用PEG介導(dǎo)的病毒侵染原生質(zhì)體體系,通過(guò)免疫熒光和電鏡技術(shù)分析Pns6、P8蛋白以及病毒粒體在水稻原生質(zhì)體中的定位;同時(shí),通過(guò)Western blot和實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析Pns6和P8蛋白及其RNA在水稻原生質(zhì)體中的積累量?!窘Y(jié)果】病毒接種水稻原生質(zhì)體48h后,Pns6蛋白在細(xì)胞質(zhì)中可以形成類似于病毒原質(zhì)(viroplasm)的點(diǎn)狀內(nèi)含體,P8蛋白也大量的表達(dá)。同時(shí),病毒粒體在水稻原生質(zhì)體中也形成內(nèi)含體狀的結(jié)構(gòu)。病毒接種水稻原生質(zhì)體12h后,均可檢測(cè)到Pns6和P8蛋白的表達(dá),并且在36h后達(dá)到最高值。病毒接種水稻原生質(zhì)體后,Pns6RNA在24h時(shí)表達(dá)量達(dá)到最高,P8RNA在36h時(shí)表達(dá)量達(dá)到最高。【結(jié)論】RDV侵染水稻原生質(zhì)體后,Pns6和P8蛋白均有表達(dá),并且病毒也可能通過(guò)形成病毒原質(zhì)來(lái)完成病毒在寄主細(xì)胞的復(fù)制和裝配。

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