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B型流感病毒在MDCK細(xì)胞上的遺傳穩(wěn)定性

作者:劉飛雪; 單亞明; 趙大鵬; 張雪梅 長春生物制品研究所有限責(zé)任公司疫苗六室; 吉林長春130012; 吉林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院艾滋病疫苗國家工程實(shí)驗(yàn)室; 吉林長春130012

摘要:目的研究流感病毒NYMC BX-51B株在MDCK細(xì)胞上連續(xù)傳代的遺傳穩(wěn)定性。方法將SPF級雞胚制備的流感病毒NYMC BX-51B尿囊液毒株接種至MDCK細(xì)胞上,連續(xù)傳代培養(yǎng)至10代(M1~M10),參照《中國藥典》三部(2015版)毒種檢定方法進(jìn)行支原體和無菌檢查、外源因子檢查、鑒別試驗(yàn),并進(jìn)行血凝試驗(yàn)和病毒滴度檢測。提取尿囊液、M1代、M10代病毒總RNA,RT-PCR法擴(kuò)增血凝素(hemagglutinin,HA)和神經(jīng)氨酸酶(neuraminidase,NA)基因,并進(jìn)行測序。結(jié)果流感病毒NYMC BX-51B株在MDCK細(xì)胞上連續(xù)傳代培養(yǎng)至M10代,血凝滴度最高可達(dá)1∶256,病毒滴度最高可達(dá)6. 5 LgCCID50/mL;鑒別試驗(yàn)、無菌檢查、支原體檢查、外源因子檢查結(jié)果均符合藥典要求。尿囊液、M1代、M10代病毒的HA和NA基因的氨基酸序列與GenBank中登錄的流感病毒NYMC BX-51B的HA和NA基因比對結(jié)果完全一致。結(jié)論 NYMC BX-51B型流感病毒在MDCK細(xì)胞基質(zhì)上連續(xù)傳代培養(yǎng)至M10代,遺傳穩(wěn)定性良好,為MDCK細(xì)胞基質(zhì)流感疫苗的研究和生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。

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中國生物制品學(xué)雜志

中國生物制品學(xué)雜志, 月刊,本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向,堅(jiān)持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性,刊載內(nèi)容涉及的欄目:疫苗研究、基礎(chǔ)研究、治療制劑、診斷制劑、技術(shù)方法、綜述、專題報(bào)道等。于1988年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。

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