摘要：為了建立基于單個B細胞制備抗體技術,本研究以O型滅活FMDV為抗原,采集健康C57/BL小鼠脾細胞,經(jīng)過磁珠富集、流式B220+/CD38+/Ig G1+/抗原+分選,獲得單個抗原特異性的B細胞。經(jīng)單細胞巢式PCR反應擴增獲得抗體完整輕、重鏈可變區(qū)序列后,分別構建輕/重鏈表達質粒,然后共轉染HEK-293細胞后,成功獲得3株特異性單克隆抗體,且證明均屬于Ig G1型抗體;ELISA結果顯示,獲得的3株抗體均能與O型FMDV抗原結合;免疫熒光試驗證明,3株抗體能夠特異性結合細胞內復制的O型FMDV。本研究成功建立了基于單個B細胞直接制備抗FMDV單抗的方法,為后期開發(fā)特異性單克隆抗體打下了堅實的基礎。