抗豬流行性腹瀉病毒納米單鏈抗體CNC-CBD-scFv的制備及鑒定
摘要：為防治豬流行性腹瀉病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),本文制備納米化抗PEDV單鏈抗體(singlechain fragment,scFv)并驗(yàn)證其生物學(xué)特性。通過PCR方法擴(kuò)增含有纖維素結(jié)合結(jié)構(gòu)域(cellulose binding domain,CBD)的單鏈抗體基因CBD-scFv,構(gòu)建抗PEDV的原核重組表達(dá)載體pET19b-CBD-scFv,鑒定正確后進(jìn)行蛋白表達(dá)與鑒定。經(jīng)硫酸水解法制備納米纖維素(cellulose nanocrystal,CNC)后,將純化復(fù)性后的CBD-scFv蛋白與CNC孵育結(jié)合得到納米抗體CNC-CBD-scFv,通過SDS-PAGE和透射電鏡鑒定復(fù)合物的結(jié)合效果。SDS-PAGE與Westernblot結(jié)果表明抗體蛋白CBD-scFv正確表達(dá);制備的納米纖維素粒度均達(dá)到納米材料級(jí)別;CNC與CBD-scFv結(jié)合后SDS-PAGE與透射電鏡結(jié)果說明CNC與CBD-scFv在室溫條件下可高效結(jié)合。本試驗(yàn)在高效表達(dá)合成復(fù)合納米抗體材料的同時(shí)為PEDV的防治及應(yīng)用奠定了一定的試驗(yàn)基礎(chǔ)。
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中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)雜志， 月刊，本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向，堅(jiān)持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：研究論文_預(yù)防獸醫(yī)學(xué)、研究論文_人獸共患病、研究論文_基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)、研究論文_動(dòng)物科學(xué)、綜述等。于1981年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。
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