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應用原代軟骨細胞與SW1353軟骨肉瘤細胞系建立體外骨關節(jié)炎模型的效果評價

作者:劉曉彤; 黃悅; 劉旭丹; 徐小磊; 姜夢琪; 楊迎春; 何健宜; 顧海倫; 劉莉 中國醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生教研室; 沈陽110100; 中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院骨科; 沈陽110004

摘要:目的通過比較白細胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)處理對原代軟骨細胞與SW1353軟骨肉瘤細胞系增殖活力、炎癥因子與炎癥通路表達水平變化的影響,為骨關節(jié)炎體外研究用細胞提供多重選擇。方法免疫細胞化學法與甲苯胺藍染色分別檢測細胞中Ⅱ型膠原與蛋白多糖,鑒定所培養(yǎng)的原代細胞是否為軟骨細胞。CCK-8法檢測IL-1β(10ng/ml)處理24h、48h、72h對原代軟骨細胞增殖活力的影響,IL-1β(1、10、20、40ng/ml)處理24h對SW1353軟骨肉瘤細胞系增殖活力的影響。IL-1β(10ng/ml)分別處理原代軟骨細胞與SW1353軟骨肉瘤細胞系細胞24h后,ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清中白細胞介素6(interleukin-6,IL-6)與基質金屬蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表達水平。Real-time PCR法檢測核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA表達水平。結果所培養(yǎng)的原代細胞為原代軟骨細胞。IL-1β(10ng/ml)處理可顯著抑制原代軟骨細胞增殖活力,但IL-1β(1、10、20、40 ng/ml)處理對SW1353軟骨肉瘤細胞系增殖活力無明顯影響。IL-1β(10ng/ml)處理可使IL-6、MMP-13表達水平及NF-κB mRNA的表達量均顯著增加。結論IL-1β作用下原代軟骨細胞與SW1353軟骨肉瘤細胞系均可表現(xiàn)出骨關節(jié)炎樣炎癥反應,二者均可用于骨關節(jié)炎的體外實驗研究。

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中國組織化學與細胞化學雜志

中國組織化學與細胞化學雜志, 雙月刊,本刊重視學術導向,堅持科學性、學術性、先進性、創(chuàng)新性,刊載內容涉及的欄目:論著、技術方法、綜述、教學研究等。于1991年經(jīng)新聞總署批準的正規(guī)刊物。

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