石英通過絲裂素活化蛋白激酶通路引起人胚肺成纖維細胞周期的改變
摘要：目的 探討在石英刺激的人胚肺成纖維細胞（human embryo lung fibroblasts,HELF）中細胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）、應激活化蛋白激酶（JNK）,細胞周期蛋白DI（cyclin D1）通路在石英誘導的細胞周期改變中的作用.方法 建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)錄因子AP-1熒光素酶報告基岡質(zhì)粒的HELF系（HELF-AP-1）及AP-1熒光素酶報告基因質(zhì)粒與絲裂素活化蛋白激酶（MAPK）顯性失活突變體質(zhì)粒（DN-ERK、DN-JNK和DN-p38）分別共轉(zhuǎn)染的HELF系（簡稱DN-ERK、DN-JNK和DN-p38）.將HELF-AP-1、DN-ERK、DN-JNK和DN-p38細胞分為對照組和石英組（共8組）,各對照組不加任何處理,石英組用200 μg/ml石英處理HELF細胞24 h.用免疫印跡（Western blot）法和免疫熒光法檢測cyclin D1、細胞周期蛋白依賴激酶4（CDK4）和E2F-4蛋白表達;采用顯性失活突變體技術(shù)驗證MAPKs信號轉(zhuǎn)導通路的上下游關(guān)系及其與細胞周期的關(guān)系;用流式細胞術(shù)檢測細胞周期變化.結(jié)果 HELF-AP-1＋石英組G1期細胞所占比例下降,S期細胞所占比例升高,與HELF-AP-1對照組的差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）.抑制ERK或JNK表達后,與HELF-AP-1對照組比較,DN-ERK＋石英組和DN-JNK＋石英組G1期細胞百分比無明顯變化.抑制p38后,DN-p38＋石英組G1期細胞百分率明顯下降,與HELF-AP-1對照組的差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）.與HELF-AP-1石英組比較,DN-ERK＋石英組和DN-JNK＋石英組CDK4表達降低和E2F-4表達增多,而DN-p38＋石英組CDK4表達和E2F-4表達沒有改變.與HELF-AP-1＋石英組比較,DN-ERK＋石英組和DN-JNK＋石英組cyclin D1表達降低,而DN-p38＋石英組cyclin D1沒有改變.結(jié)論 ERK和JNK通過cyclin D1和CDK4介導石英誘導的HELF的細胞周期改變,而石英誘導的細胞周期改變與p38無關(guān).
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中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志
中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志， 月刊，本刊重視學術(shù)導向，堅持科學性、學術(shù)性、先進性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：述評、論著、調(diào)查研究、實驗研究、勞動衛(wèi)生監(jiān)督與管理、職業(yè)衛(wèi)生服務、職業(yè)衛(wèi)生評價等。于1983年經(jīng)新聞總署批準的正規(guī)刊物。
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