摘要：目的探討腸道病毒病毒71型衣殼蛋白VP1誘導EV71感染患兒外周血T淋巴細胞產(chǎn)生干擾素-γ(IFN-γ)應答特征。方法收集2010年9月至2011年12月西安交通大學醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院和西安市兒童醫(yī)院住院的EV71感染手足口病患兒共31例,根據(jù)臨床特征分為3組:急性感染期組(16例)、臨床恢復期組(9例)和感染恢復后1個月組(6例);另外,選取10例健康兒童為對照組。通過重疊肽技術合成覆蓋EV71衣殼蛋白VP1 36條重疊肽段作為抗原,采用IFN-γ酶聯(lián)免疫斑點分析法(ELISPOT)和磁珠分選法(MACs)體外檢測各組患兒EV71 VP1特異性CD4~+T細胞和CD8+T細胞免疫應答特征。結果急性感染期組有4例(25%)患兒對VP1蛋白存在T細胞免疫反應,臨床恢復期組5例(56%)患兒對VP1蛋白存在T細胞免疫反應,其中EV71感染臨床恢復期組患者反應強度最強,顯著高于急性感染期,差異有統(tǒng)計學意義(Z=-2.042、P=0.041),而感染恢復后1個月組和對照組均未檢測到T細胞免疫反應,臨床恢復期組患者T細胞反應強度顯著高于感染恢復后1個月組(Z=-2.105、P=0.035)和對照組(Z=-2.633、P=0.008),差異均有統(tǒng)計學意義;提示EV71感染患兒VP1蛋白被識別的頻率(即例數(shù))隨著臨床癥狀及體征消失而消失。VP1蛋白誘導的細胞免疫應答以特異性CD4~+T細胞為主導;篩選確定了8個EV71 VP1蛋白區(qū)CD4~+T細胞表位。結論 EV71感染患兒在發(fā)病期對VP1蛋白存在特異性T細胞反應,且以特異性CD4~+T細胞為主導;篩選確定EV71感染患兒VP1蛋白的CD4~+T細胞表位有助于闡明EV71感染的細胞免疫學發(fā)病機制。